新版GMP对制药用水都做了哪些要求
制药用水是药品生产过程中重要的原辅材料，在新版GMP的指导下保证用水质量、保证产品质量。
制药用水需要做哪些项目的检测？需要注意什么问题？如何验证？跟我们一起来看看吧。
制药用水所检项目有哪些？
制药用水根据不同的使用范围分为饮用水、纯化水、注射用水和灭菌注射用水。
这里我们只针对纯化水（PW）和注射用水（WFI）进行分析讨论。根据中国药
典规定，PW需检验项目为：性状、酸碱度、氨、硝酸盐、亚硝酸盐、电导率、
总有机碳（TOC）、不挥发物、重金属、微生物限度。WFI所需检验项目与PW
相比，将酸碱度更换为pH值，增加了细菌内毒素控制，其余检验项目与PW基本
相同，但是微生物的控制标准要严于PW的标准。
微生物限度检测方法的确认
方法适用性试验。纯化水培养基适用性检查方面，相应进行R2A琼脂培养基的
适用性检查，菌株为铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌。以及无菌培养试验。
方法：取不大于100cfu菌液，于购买的R2A琼脂培养基，快速涂布，每一菌株
平行2个平板。同样操作涂布与中检院购买的对照培养基，培养5天。
无菌培养试验：取2平皿，作为阴性对照培养。标准：被测培养基上的菌落平均
数与对照培养基上的菌落平均数比值应在0.5-2之间，菌落形态、大小一致。无
菌培养，培养基上无微生物生长。
纯化水计数方法适用性方面，水作为无抑菌作用的溶剂，进行微生物回收试验
意义不大，因此，应不进行计数方法适用性试验。R2A培养基，营养欠丰富，
有利于损伤微生物的回收，培养时间不低于5天。
准备工作注意哪些？
（如天平、pH计、电导率仪、培养箱等）是否经过了校准，是否在校准效期
内，有些仪器还需要使用前校准或日校，比如天平，pH计。
微生物限度检验所用的生物安全柜（或超净工作台）、微生物过滤系统和培养
箱应保证在确认效期内。用到的关键耗材，如微孔滤膜及滤杯等物料应保证其
无菌性，可购买一次性无菌过滤器，也可在经验证的灭菌程序下灭菌，并在经
验证的有效期内使用，但微孔滤膜不建议用户自行湿热灭菌，因为湿热灭菌可
能会引起滤膜孔径的改变，除非有充分的证据证明灭菌后的滤膜仍满足使用需
求。这些的确认合格与否，将直接关系到检验结果的准确性。
细菌内毒素的检验可以在超净工作台内进行，也可以在普通试验台上进行试验
操作，但仍需注意操作环境的洁净状况，操作房间应保持较好的卫生状况，避
免环境对测试结果的影响。
（2）试剂试液检查要检测项目所用到的试剂是否在有效期内。pH计校准所用
标准缓冲液是否合适，一般定点用的缓冲液与所测样品的pH值接近，样品的pH
值要在定点和调斜率的缓冲液pH值范围内。pH缓冲液的温度应在25℃±2℃范
围内。
检测微生物限度所用的培养基为R2A琼脂培养基，配制时应使用在有效期及开瓶
有效期内的干粉培养基，培养基应进行培养基适用性检查，中国药典规定，如培
养基配制过程已经过验证，则可以只针对每批干粉培养基进行适用性检查，EP和
USP则要求须对每个配制批进行检查。
检测细菌内毒素所用鲎试剂和内毒素标准品是否在效期内，凝胶法鲎试剂应进行
灵敏度复核试验，光度法用鲎试剂应进行标准曲线的可靠性试验。
影响电导率结果的因素？
将取样容器取满，密封，应在尽量短的时间内进行测定，能够减少可溶性气
体对测定结果的影响。
测定TOC时的注意事项？
TOC测定时，应避免有机物和CO2对测定结果的影响。取样时应采用密闭玻
璃容器，容器顶空应尽量小，取样后，应立即测试，以减少塞子和容器对测
定结果的影响。
测定需比色的检验项目时的注意事项
用同套的比色管，对比时所有比色管中液体应体积相同。观察方式有两种，一种是在白色
背景上自上而下透视，适于色泽较浅时采用，另一种是在白色背景前平视观察，适于色泽
较深时采用。同时检验人员不应有色弱或色盲等
微生物限度检查时注意事项？
人员应经过培训且考核合格，应具备微生物的基础知识和洁净室的行为规范。
进入洁净区前后应检查洁净区内压差及温湿度是否在规定范围内；准备所需
物品和样品经消毒剂擦拭消毒后，放入传递窗对表面进行紫外消毒，紫外消
毒只能作为辅助手段，而不能完全代替化学消毒剂，紫外消毒时应注意避免
对样品的影响。
检验时，最好将检验所用物品器具和样品一次性全部放入检验设备中，但实
际工作中如物料很多，全部传入影响操作和气流，可以分多次，一般先检验
WFI再检验PW。检验开始前，手部应放入设备内与物料一起自净数分钟。
操作进行中，应避免微生物的污染，手部最好不要离开操作区域，不可避免
时，应注意对手部及腕部的消毒。检验中动作幅度要小，避免影响气流流向。
应采用薄膜过滤法对WFI及PW进行检验，样品过滤后，应保证滤膜的干燥
度。贴滤膜时，应避免产生气泡，而影响微生物的生长。水系统运行稳定
时，为了使检验结果更加能反映出水系统的真实情况，样品检验量在满足法
规的前提下，可根据样品中微生物负载情况定期评估后确定。
检验过程中应全程持续监测沉降菌，检验结束后要对设备表面和人员双手进
行表面微生物监测，浮游菌和悬浮粒子也应定期监测。样品培养时，可不必
逐天记录微生物生长数量，但应注意避免个别时出现严重的菌落蔓延情况而
导致无法计数。
细菌内毒素检查时注意事项
细菌内毒素工作标准品和鲎试剂在使用前应逐支检查外观，发现安瓶有裂
缝，或试剂颜色改变时，不能使用，使用前应保证其温度处于室温。开安
瓿瓶时要注意安全问题，必要时可借助工具开启。
溶解鲎试剂及混匀供试品和鲎试剂时，不要剧烈振荡避免产生气泡。由于
凝集反应是不可逆的，所以在反应过程中及观察结果时应注意不要使试管
受到振动，以免使凝胶破碎产生假阴性结果。乙醇消毒剂有可导致BET出
现假阴性的风险，检验过程中应避免使用。
偏差调查
对测定结果不合格的样品，应及时报告主管，并启动OOS调查，找出根本原因，
并制定预防措施，防止再次发生类似情况。所有检项测定完成后，出具检验报告。
对测定结果不合格的样品，应及时报告主管，并启动OOS调查，找出根本原因，
并制定预防措施，防止再次发生类似情况。所有检项测定完成后，出具检验报告。